Analyse PCR: qu'est-ce que c'est? Comment prendre le test PCR correctement

Il n'y a pas si longtemps, un fiable,une méthode très sensible et rapide de diagnostic de diverses maladies infectieuses d'une personne. Cette méthode est appelée "analyse PCR". Qu'est-ce que c'est, quelle sera son essence, quels micro-organismes il peut révéler et comment le remettre correctement, nous le dirons dans notre article.

Histoire de la découverte

Inventé la méthode de réaction en chaîne par polymérase (PCR)Scientifique américain Cary Myullis en 1983. Initialement breveté la méthode de diagnostic par la société "Cetus Corporation", dans laquelle son créateur a travaillé. Mais en 1992, tous les droits et brevets ont été vendus à la société "Hoffman-La Roche". Après cela, il est apparu que des études similaires parallèles ont été menées et ont été enregistrées par d'autres biologistes américains, tels que Alice Chen, David Edgar, John Treel. En 1980, les scientifiques soviétiques A. Slyusarenko, A. Kaledin et S. Gorodetsky ont traité ce problème. Par conséquent, il était impossible de déterminer le seul titulaire du droit. De nombreux biochimistes exceptionnels ont contribué au développement de la méthode de réaction en chaîne de la polymérase et breveté leurs innovations. À l'heure actuelle, l'analyse PCR est effectuée partout dans des laboratoires spécialement équipés.

L'essence de la méthode de diagnostic PCR

Analyse PCR: qu'est-ce que c'est et comment ça marche? L'essence de la méthode est d'augmenter dans un milieu microbien spécifique au moyen d'une enzyme spéciale de l'ADN polymérase dans des conditions artificielles. Pour ce faire, multipliez le matériel ADN existant. Ainsi, en présence d'un micro-organisme pathogène dans l'échantillon, sa quantité sera augmentée par des manipulations biochimiques en laboratoire, et la bactérie ne peut pas être détectée au microscope.

Analyse PCR - qu'est-ce que c'est?

Comment la recherche matérielle est-elle menée?

L'analyse nécessite:

  • Matrice d'ADN;
  • des amorces reliant les extrémités d'un fragment de matériau;
  • une enzyme ADN polymérase thermiquement stable;
  • les substances chimiques qui assurent le bon fonctionnement des enzymes;
  • une solution tampon nécessaire pour créer des conditions appropriées pour la croissance et le développement du matériel d'ADN.

    Analyse PCR 12

Pour effectuer la PCR, 25-30 répétitions sont réalisées, comprenant trois étapes: dénaturation, hybridation et allongement.

Pour l'analyse de la réaction en chaîne de la polyméraseutiliser un appareil spécial - un amplificateur. Un équipement moderne vous permet de régler le programme nécessaire pour chauffer et refroidir les tubes afin d'éliminer les erreurs lors du diagnostic.

Où le diagnostic est-il utilisé?

La méthode de réaction en chaîne par polymérase est utilisée dans divers domaines de la médecine:

  • Les médecins légistes l'utilisent pour identifier le matériel génétique, tel que les cheveux, la salive ou le sang;
  • L'analyse de sang par PCR aide au génotypage, par exemple, pour détecter une réaction génétique individuelle à un médicament spécifique;
  • à l'aide d'une telle méthode établir l'existence de liens familiaux entre les personnes;
  • la méthode de PCR la plus populaire est devenue dans le diagnostic médical pour la définition de diverses maladies infectieuses.

Quelles infections révèlent la PCR?

Ainsi, la médecine a longtemps et avec succès utilisé l'analyse de la PCR. Qu'est-ce que c'est, nous avons déjà appris. Et quels pathogènes peuvent être détectés avec? Les maladies infectieuses suivantes sont diagnostiquées par PCR:

  • l'hépatite A, B, C;
  • l'ureaplasmose;
  • Candidose;
  • la chlamydia;
  • mycoplasmose;
  • Gardnerellez;
  • mononucléose infectieuse;
  • la trichomonase;
  • infection par le papillomavirus;
  • la tuberculose;
  • infection herpétique des types 1 et 2;
  • Helicobactériose;
  • cytomégalovirus;
  • la diphtérie;
  • la salmonellose;
  • Infection par le VIH.

    Analyse PCR pour le VIH

En outre, les méthodes de PCR sont utilisées dans le diagnostic du cancer.

Avantages

Diagnostic La PCR présente plusieurs avantages:

  1. Haute sensibilité Même avec seulement quelques molécules d'ADN du micro-organisme, l'analyse par PCR détermine la présence d'une infection. La méthode aidera dans les maladies chroniques et latentes. Souvent, dans de tels cas, le micro-organisme est incultivé d'autres façons.
  2. Afin d'étudier tout matériau approprié, tel que la salive, le sang, la sélection sexuelle, les cheveux, les cellules épithéliales. Le plus courant est un test sanguin et tampon urogénital PCR.

    PCR: faites le test

  3. Il ne nécessite pas de culture à long terme. Processus de diagnostic automatisé vous permet d'obtenir les résultats de l'étude après 4-5 heures.
  4. La méthode est presque 100% fiable. Seuls les cas uniques d'un faux résultat négatif ont été enregistrés.
  5. La possibilité d'identifier plusieurs typespathogènes d'un seul échantillon de matériel. Cela non seulement accélère le processus de diagnostic de la maladie, mais réduit également considérablement les coûts matériels. Souvent, le médecin prescrit une analyse PCR complète. Le prix de l'examen, consistant en la définition de six pathogènes, est d'environ 1500 roubles.

Recommandations pour la préparation de l'analyse

Pour que les résultats soient fiables dans l'étude PCR, l'analyse doit être faite en suivant les recommandations pour la préparation préliminaire au diagnostic:

  1. Avant d'abandonner la salive, vous devez vous abstenir de prendre de la nourriture et des médicaments 4 heures avant de prendre le produit. Immédiatement avant la procédure, rincez-vous la bouche avec de l'eau bouillie.
  2. Les règles ci-dessus doivent être suivies lors de la prise d'un échantillon de la surface interne de la joue. Après rinçage, il est recommandé d'effectuer un léger massage cutané pour isoler la sécrétion de la glande.
  3. L'urine est habituellement récoltée à la maison. Pour ce faire, vous devez effectuer une toilette complète des organes génitaux. Il est nécessaire de recueillir 50-60 ml d'urine dans un récipient en plastique stérile. Pour assurer la pureté du matériel, il est recommandé que les femmes insèrent un tampon dans le vagin et que les hommes tirent le pli cutané au maximum. Vous ne pouvez pas prendre le matériel pendant le flux menstruel.
  4. Pour le sperme, vous devez vous abstenir de sexuelleAgissez pendant 3 jours avant la collecte. En outre, les médecins conseillent de refuser de visiter le sauna et de prendre un bain chaud, en buvant de l'alcool et de la nourriture épicée. 3 heures avant le test, vous devez vous abstenir d'uriner.
  5. Pour la livraison de frottis urogénital, par exemple siune analyse est réalisée sur la chlamydia PCR, les femmes et les hommes sont recommandés repos sexuel pendant 3 jours. Deux semaines avant le test, les médicaments antibactériens ne doivent pas être pris. Pour une semaine, vous devez cesser d'utiliser des gels intimes, des onguents, des suppositoires vaginaux, des seringues. 3 heures avant le test, vous devez vous abstenir d'uriner. Pendant la menstruation, la collecte de matériel n'est pas effectuée, seulement après 3 jours après l'arrêt de l'écoulement du sang peut prendre un frottis urogénital.

PCR pendant la grossesse

Dans la période d'attente du bébé de nombreux contagieuxLes maladies sexuellement transmissibles sont extrêmement dangereuses pour le développement normal du fœtus. Les MST peuvent provoquer un retard de croissance intra-utérin, une fausse couche ou une naissance prématurée, des malformations congénitales de l'enfant. Par conséquent, il est extrêmement important de passer un test de PCR précoce. Il est nécessaire de soumettre l'analyse lors de l'enregistrement - jusqu'à 12 semaines.

Analyse sur la PCR Chlamydia

Le matériau de clôture provient du canal cervicalà l'aide d'un pinceau spécial. La procédure est indolore et ne constitue pas un danger pour le bébé. Habituellement pendant la grossesse, la chlamydia est analysée par la méthode PCR, ainsi que l'uréeplasmose, la mycoplasmose, le cytomégalovirus, l'herpès et le papillomavirus. Un tel complexe d'examens est appelé PCR-6.

PCR pour le diagnostic du VIH

En relation avec le fait que la méthode de réaction en chaîne par polymérasela réaction est très sensible aux changements dans le corps et les conditions du diagnostic, de nombreux facteurs peuvent affecter le résultat. Par conséquent, l'analyse PCR pour l'infection par le VIH n'est pas une méthode fiable, son efficacité est de 96-98%. Dans les 2 à 4% des cas restants, le test donne des résultats faussement positifs.

Mais dans certaines situations, sans diagnostic par PCR du VIHne pas gérer. Habituellement, il est administré aux personnes ayant un résultat ELISA faux négatif. De tels indicateurs indiquent que la personne n'a pas encore développé d'anticorps contre le virus et qu'ils ne peuvent être détectés sans une augmentation multiple du nombre. Cela peut être réalisé en effectuant un test sanguin en utilisant une méthode PCR.

En outre, ce diagnostic est nécessaire pour les enfants de la première année de vie nés d'une mère séropositive. La méthode est le seul moyen de déterminer de manière fiable le statut d'un enfant.

PCR pour le diagnostic de l'hépatite

La méthode de réaction en chaîne de la polymérase permetdétecter l'ADN du virus de l'hépatite A, B, C longtemps avant la formation d'anticorps contre l'infection ou l'apparition des symptômes de la maladie. L'analyse de la PCR pour l'hépatite C est particulièrement efficace car, dans 85% des cas, une telle maladie se manifeste de façon asymptomatique et, sans traitement rapide, elle passe à un stade chronique.

Test sanguin PCR

La détection rapide de l'agent pathogène aidera à éviter les complications et un traitement prolongé.

Enquête complète sur la PCR

Analyse PCR complexe: qu'est-ce que c'est?Cette méthode d'essai réaction en chaîne de polimezarnoy qui comprend la détermination simultanée de plusieurs espèces infection: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, la candidose, la trichomonase, cytomégalovirus, ureaplasma urealitikum, 1er et 2ème herpès type papillomavirus gonorrhée. Le prix de ces diagnostics varie de 2000 à 3500 roubles. en fonction de la clinique, les matériaux et l'équipement, ainsi que sur le type d'analyse: qualitative ou quantitative. Ce qui est nécessaire dans votre cas - le médecin décidera. Dans certains cas, vous détectez tout simplement la présence de l'agent pathogène dans d'autres, comme le VIH, le rôle important joué par titre quantitatif. appelé « analyse par PCR de 12 » dans le diagnostic de tous de l'examen des agents pathogènes ci-dessus.

Explication des résultats d'analyse

Le décodage de l'analyse PCR n'est pas difficile.Il n'y a que 2 échelles de l'indicateur - "résultat positif" et "résultat négatif". Si un agent pathogène est détecté, les médecins peuvent confirmer la présence de la maladie avec un degré de confiance de 99% et procéder au traitement du patient. Dans la méthode quantitative de détermination de l'infection dans la colonne correspondante, la valeur numérique des bactéries détectées sera indiquée. Seul un médecin peut déterminer le degré de la maladie et prescrire le traitement nécessaire.

Où passer l'analyse PCR?

Dans certains cas, par exemple, pour déterminerL'infection par le VIH par la méthode PCR, avec un résultat négatif, il devient nécessaire de procéder à des examens supplémentaires pour confirmer les résultats.

Où prendre l'analyse?

Où soumettre l'analyse PCR:dans l'état polyclinique ou dans un laboratoire privé? Malheureusement, dans les institutions médicales municipales, l'équipement et les méthodes sont souvent dépassés. Par conséquent, il est préférable de donner la préférence à des laboratoires privés avec des équipements modernes et un personnel hautement qualifié. De plus, dans une clinique privée, vous obtiendrez des résultats beaucoup plus rapidement.

A Moscou, de nombreux laboratoires privés offrentmener une analyse PCR sur diverses infections. Par exemple, dans des cliniques telles que Vita, Complex Clinic, Happy Family et Uro-Pro, une analyse PCR est effectuée. Le prix de l'examen est de 200 roubles. pour la définition d'un pathogène.

On peut conclure que le diagnostic d'infectionDans la plupart des cas, la PCR est un moyen rapide et fiable de détecter le pathogène dans le corps au début de l'infection. Mais dans certains cas, il vaut la peine de choisir d'autres méthodes de diagnostic. La nécessité de mener une telle étude ne peut être déterminée que par un spécialiste. Décoder l'analyse PCR nécessite également une approche professionnelle. Suivez les recommandations du médecin et ne vous passez pas les tests, qui ne sont pas nécessaires.

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